酶标板(ELISA PLATE)在酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,参与免疫学反应的抗原、抗体、标记抗体或抗原的纯度、浓度和比例;缓冲液种类、浓度和离子强度、pH值和反应温度、时间等条件起着关键作用。
一、高结合力酶标板
酶标板经表面处理后蛋白结合能力大大増强,可达300-400ng 1gG/cm2,主要结合的蛋
白分子量>10kD。使用该类酶标板可提高敏感性,并可相对减少包被蛋白的浓度和用量,不足之处为较易产生非特异性反应。抗原或抗体包被后,以非离子去污剂无法有效地封闭未结合蛋白的部位,需使用蛋白作为封闭剂。
二、中结合力酶标板
酶标板经表面疏水键被动与白结合,适合作为分子量20D的大分子蛋白的固相载体,其蛋白结合能力为200-300ng 1gG/cm2。由于该类酶标板所具有的仅与大分子结合的特性,适用于作为未纯化抗体或抗原的固相载体,可降低潜在的非特异性交又反应。该类板可以惰性蛋白或非离子去污剂作为封闭液。
三、氨基化酶标板
醇标板经表面改性处理后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由杀水键取代。该类酶标板适合作为小分子蛋白的固相载体。使用合适的缓冲液和pH值,其表面可通过离子键与带负电荷的小分子结合。由于其表面的亲水特性和可通过其它交联剂共价结合的能力,可用于固定溶于 Triton-100、Tween20等去污剂的蛋白分子。该类板的缺陷为由于降低了疏水性,一部分蛋白分子无法结合;此外,其表面需有效地封闭。由于亲水和共价的表面特性,使用的封闭液必须能够与非反应性氨基基团和所选择的交联剂中任何功能基团发生作用。
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