在ELISA实验的过程中，血清培养是很重要的步骤，但是在这过程中也会出现一些的问题，比如说，在培养进程中会出现一个个“小黑点”的现象，这是怎样一回事呢？接下来就为大家解析一下这个现象出现的原因以及解决方法。
我们一旦发现培养基中有黑点，我们先不要着急，也不要慌张，要搞清楚这个黑点是什么？什么构成的？首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状况，黑点是否游动等。如果细胞被污染，微生物则会不断繁衍，培养基就会敏捷变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状况出色，与黑点出现前比较，没有任何改变，那么，黑点的出现或许与以下几种状况有关：第一，细胞生长过老，黑点是破碎的细胞残骸；第二，血清质量欠好，重复冻融的效果；第三，制作培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；第四，制作培养基的水质、容器不合格（可应用离心、过滤的方法去除这些黑点）；第五，培养的原代细胞中出现小黑点（或许是原代组织中的杂质，屡次传代能够消除）。
那么我们怎样防止黑点生成呢？一般要做到以下几点：
（1）尽可能减少血清冻融次数。
（2）培养基无需37℃水浴。
（3）培养基保持PH值7.0- 7.2。
（4）严格控制制作培养基的水质，容器定时冲刷。
（5）掌握细胞传代的机会，细胞切勿生长过老。
以上就是血清培养中出现小黑点的原因以及解决办法，大家在选择血清时要结合专业知识，尽可能选用客观性强的指标，在仪器和试剂允许的条件下，选用特异性强、ELISA试剂盒灵敏度高、准确可靠的客观指标，一定要事先规定读取数值的严格标准，只有这样才能准确地分析自己的实验结果，从而也大大提高了自己实验结果的可信度。
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