ELISA试剂盒因其准确性高、灵敏度高、特异性强等因素被广泛应用。但这些优点，并非全部的试剂盒都具备，今天我们就来分析一下有些ELISA试剂盒灵敏度低的原因。
1、超过有效期。试剂盒必须在有效期内使用，超过有效期的产品可能会产生很弱的信号。
2、试剂盒没有按规定进行保存，受高温影响。
3、试剂、样品用前未平衡至室温。
4、加入试剂的体积和时间有误，移液器计量不准，吸嘴内水分太多或不清洁。
5、洗板及加样过程中，酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力。
6、孵育时间及孵育温度未达到要求，反应板放入培养箱时注意温度并及时调整。
7、洗板次数过多，或浓缩洗液稀释倍数不符合要求，洗涤冲击力太大，浸泡时间太长等。
8、显色剂加量不足或顺序颠倒，或混合后加入。
9、底物作用时间不够。
10、蒸馏水水质有问题。
相应的解决方法：
1、实验前检查试剂的组分及批号，确认试剂未过期。
2、不要将试剂盒长时间置于常温下，按使用规定储藏。
3、试剂、样品用前平衡至室温。
4、确定所使用的试剂体积正确，加入时间适当。校正移液器，移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快，排放应完全。
5、确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等，确认配制洗液的容器已洗干净，确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染。
6、孵育温度应控制在 37-38℃，孵育时间严格按照说明书操作。保温期内不宜多开门，以免影响保温。
7、严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板，减小洗涤冲击力，按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数。
8、显色剂滴瓶垂直向下，持力均匀，滴速不宜过快，先加显色剂 A，后加显色剂B，不可将A、B液混合后加入
9、准确定时。
10、测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响。
ELISA试剂盒灵敏度低会对ELISA实验的结果造成很大的而影响，所以在进行实验之前，大家一定要对ELISA试剂盒进行检查，并按照要求进行保存和处理。
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