ELISA实验中为什么要洗刷?这一过程有那么重要吗?洗刷虽不是一个反响过程,但却也决议着试验的胜败。ELISA靠洗刷来到达别离游离的和结合的酶符号物的意图。通过洗刷以铲除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反响过程中非特异性地吸附于固相载体的搅扰物质。下面小编就给大家介绍下ELISA试剂盒洗刷的两大办法。
一、浸泡式
1.吸干或甩干孔内反响液;
2.用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后,即甩去);
3.浸泡,行将洗刷液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇摆,浸泡时刻不行随意缩短;
4.吸干孔内液体。吸干应完全,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
5.重复操作c和d,洗刷3-4次(或按阐明规则)。在间接法中如本底较高,可增加洗刷次数或延长浸泡时刻。
二、流水冲刷式
开始用于小珠载体的洗刷,洗刷液仅为蒸馏水乃至可用自来水。洗刷时附接一特别设备,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲刷 2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲刷式则比如淋浴,其洗刷作用更为完全,且也简洁、快速。已有试验表明,流水冲刷式相同也适用于微量滴定板的洗刷。洗刷时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗刷作用更佳。
|